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奧林巴斯體視顯微鏡SZ61熒光觀察斑馬魚器官組織
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長恒榮創

時間 : 2025-06-12 09:36 瀏覽量 : 66

使用奧林巴斯體視顯微鏡 SZ61 進行斑馬魚器官組織的熒光觀察,可參考以下步驟:


觀察前準備

斑馬魚樣品制備:選擇合適發育階段的斑馬魚胚胎或幼魚,例如兩天大的幼魚。在斑馬魚產下胚胎后,將其分離并飼養在 28 攝氏度的 E3 水溶液中,在最初的 24 小時里加入 0.003% 1 - 苯基 - 2 - 硫脲溶于 10% 生理鹽水的 PTU 溶液,以抑制斑馬魚早期的色素分泌,保持其透明性。成像前,將斑馬魚固定在瓊脂糖中,具體是加熱熔解 1% 的瓊脂糖并鋪滿培養皿底部,冷卻凝固后,將斑馬魚幼魚攜帶少量 E3 溶液釋放在瓊脂糖上,再滴加 1-2 滴熔解的瓊脂糖并冷卻凝固,最后加入 E3 溶液。

顯微鏡熒光附件安裝:安裝熒光附件,包括熒光光源及濾光片。根據實驗中使用的熒光標記物的激發和發射波長,選擇合適的熒光濾光片。


顯微鏡操作

開啟與調節:打開顯微鏡電源開關,旋轉亮度調節按鈕,調節熒光光源到適當的亮度。

樣品放置:將固定有斑馬魚的培養皿放在顯微鏡工作臺上。

對焦與觀察:調節對焦旋鈕,使鏡臂上下移動,讓焦點落在標本上,獲得清晰的圖像。通過目鏡觀察熒光標記的器官組織的形態和結構,同時可轉動變倍筒左右側的變倍旋鈕,根據需要改變樣品圖像的放大倍數,以觀察不同層次的細節。若有需要,可調整觀察筒的距離和屈光度,以適應不同觀察者的眼睛狀況。


觀察與記錄

觀察內容:注意觀察熒光標記在斑馬魚器官組織中的分布情況,例如特定基因表達導致的熒光蛋白在某個器官中的特異性表達,或者熒光染料標記的細胞在組織中的位置和形態等。

圖像記錄:如果顯微鏡配備了數碼攝像頭,可將其連接到顯微鏡的三目鏡筒上,通過相關軟件界面觀察樣品圖像,并進行實時記錄和分析,方便后續進一步研究和對比。


觀察后處理

關閉電源:觀察結束后,關掉電源,取走樣品。

清潔與維護:對顯微鏡進行清潔,用干凈的軟布擦拭鏡頭和載物臺等部件,防止灰塵和污漬影響下次使用。將顯微鏡用防塵罩嚴密保護起來,以防止灰塵進入光學系統和其他部件。

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